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更新時間:2025-10-21
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動物或植物細胞發(fā)生氧化應激(oxidative stress)時,會發(fā)生脂質氧化。丙二醛(Malondialdehyde, MDA)是一種生物體脂質氧化的天然產物,一些脂肪酸氧化后逐漸分解
為一系列包括 MDA 在內的復雜化合物,此時通過檢測 MDA 的水平即可檢測脂質氧化的水平,因此 MDA 的測定被廣泛用作脂質氧化的指標。生物體內的一些其它生化反應也會產生MDA,例如 thromboxane synthase 也可以催化產生,但只要在測定時設置適當對照即可觀察到脂質氧化水平的變化。植物丙二醛(MDA)檢測試劑盒(TBA 比色法)(Plant MDA Assay Kit with TBA)又稱脂質氧化(MDA)檢測試劑盒,是采用一種基于 MDA 和thiobarbituricacid, TBA反應產生紅色產物的顯色反應,隨后通過比色法用于對植物組織(根、莖、葉、種子等)MDA 進行檢測,是專門用于植物脂質氧化(lipidperoxidation)水平檢測的試劑盒,不適用于動物組織、細胞、血液等;丙二醛在較高溫度及酸性環(huán)境中可與 TBA 發(fā)生反應,形成紅色的 MDA-TBA 加合物,MDA-TBA 加合物在 532nm 處有最大吸收,該復合物的吸光系數(shù)為 155mmol/(L.cm),并且在 600nm 波長處有最小吸收,植物組織中糖類物質對MDA-TBA 反應有干擾,我們總結出經驗公式,以消除這一干擾,亦可以通過比標準品進行比較,進行含量檢測。該試劑盒僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。
操作步驟(僅供參考):
1、樣本處理
2、配制 TBA 工作液
3、稀釋標準品
4、樣品測定
計算:如果進行簡易快速檢測,直接以 10μM 標準品進行計算,獲得 MDA 的摩爾濃度;
如果采用經驗公式,無需制作標準曲線或測定標準品;如果需要精確計算,以 MDA 標準品濃度為橫坐標,以對應的吸光度為縱坐標,制作標準曲線,根據(jù)標準曲線計算處 MDA 提取液的濃度;對于固體狀組織,可以通過單位重量的蛋白含量或組織重量等來表示最初樣品中的 MDA 含量,例如μmol/mg 蛋白或μmol/mg 組織。
注意事項:
1、 上述低溫試劑避免反復凍融,以免失效或效率下降。
2、 如果沒有分光光度計,也可以使用酶標儀測定,檢測樣品量會相應增加。
3、 待測樣品盡量新鮮,提取后應盡快檢測,以免活性下降。
4、 待測 MDA 提取液如不能及時測定,應置于-20℃保存,4 天內穩(wěn)定。
有效期:12 個月有效。
植物丙二醛(MDA)檢測試劑盒(TBA 比色法)
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